葉酸類的許多種化合物廣泛分布于多種生物中。許多種植物的綠葉均能合成葉酸,各種綠葉蔬菜,如菠菜、青菜、龍須菜、花椰菜、萵苣、扁豆、蘑菇,各種瓜、豆,水果,如香蕉、檸檬,動物食物,如肝、腎,乳制品等,均含有豐富的葉酸,許多種細菌,包括腸道細菌能將喋啶、對氨基苯甲酸及谷氨酸結合成葉酸。酵母亦含有豐富的葉酸。

一般食物中雖然葉酸含量很豐富,但烹飪,特別是將食物在大量水中烹煮過久,能將大部分葉酸破壞。磺胺藥能阻止對氨基苯甲酸的結合,因而抑制細菌合成葉酸。人類自己不能合成葉酸,必須依靠食物中的葉酸加以消化而吸收。

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