睪酮主要是在男性睪丸間質細胞中生成,女性血液中少量睪酮則為脫氫異雄酮的代謝產物,是體內的主要雄性激素,測定血漿睪酮可用于女子性征異常的診斷。主要是臨床應用評價男性性功能減退,比如性欲減退,勃起功能障礙。男子女性型乳房,骨質疏松癥和不育。評價男孩子青春期延遲或早熟,監測睪酮替代治療的效果,監測抗雄激素治療。評價女性多毛癥,女性男性化,診斷雄激素分泌性腫瘤。
睪酮升高常見于特發性性早熟和兒童的腎上腺皮質增生,部分腎上腺皮質腫瘤,男子分泌促性腺激素腫瘤,懷孕期絨毛膜上皮疾病,睪丸女性化,原發性多毛癥,藥物如巴比妥類的鎮靜藥,克羅米芬促性腺激素,口服避孕藥等等。減低見于唐氏綜合征,尿毒癥,肌強直性營養不良癥,肝功能不全,原發和繼發性性腺功能不全等等。